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腺病毒包装及腺病毒扩增

发布日期:2022-02-25  来源:GM

1.服务介绍

   腺病毒感染范围广,几乎可以感染所有细胞系、原代细胞和部分组织。感染效率高达100%,可全面超越其它病毒载体工具和脂质体转染。 腺病毒(Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒,其复制不依赖于宿主细胞的分离。有近50个血清型,大多数Ad载体都是基于血清型2和5,通过转基因的方式取代E1和E3基因,降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制,因此是一种适用于治疗的高校控制系统。


2. 实验结果展示

腺病毒包装及腺病毒扩增1.jpg

293细胞腺病毒P2代 白光视野(200x)    

腺病毒包装及腺病毒扩增2.jpg

293细胞腺病毒P2代 荧光视野(200x)

 

3.实验流程

接种293细胞——培养12h,密度70%,病毒包装——6h后换液——24h-48h后,镜下观察荧光,病毒收集,-80℃和37℃反复冻融3次——病毒感染293细胞,连续进行三代感染。


4.注意事项

⑴病毒收集时,注意个人防护,及实验过程中用到培养瓶等消毒处理;

⑵病毒转染后,可以通过显微镜下观察荧光初步判断病毒是否包装成功;

⑶37℃融化时一旦病毒融化就马上取出,长时间在37℃温育会降低病毒滴度,完全融化后可以剧烈震荡30s,冻融周期通常会持续2~4次才可以获得高滴度的病毒。


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