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ChIP

发布日期:2022-02-22  来源:GM

1.服务介绍:

染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation),简称ChIP,是通过研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互关系,来阐明真核生物基因表达机制的基本途径,是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的唯一方法。

 

2.实验结果展示:

1.ChIP-产物检测


 ChIP-2.jpg

  

2.ChIP-seq产物检测

 ChIP1.jpg

 

3.实验流程:

样本处理--超声检测--免疫沉淀--洗脱--产物检测--产物测序--结果比对分析


4.送样运输要求:

1.只接受细胞样本,每次免疫沉淀使用量大约4*106细胞量及以上,外地需要按照预处理步骤处理细胞,然后收集细胞沉淀,干冰运输;

2.抗体要求为ChIP级别,-20运输;

3.引物可由客户提供,干粉常温运输,液体-20运输;也可以提供转录因子和启动子以及样本种属信息,我们进行预测并设计合成引物。


5.外地运输预处理步骤:

1.取出含有10ml培养基的10cm培养皿,培养皿内加入270ul 37%甲醛,短暂旋转混匀并置于室温下敷育10min,使甲醛的终浓度为1%。添加甲醛可能导致培养基颜色发生变化;

2.终止交联:每个含10ml培养基的培养皿添加1ml甘氨酸,稍微涡旋混合,并在室温下敷育5min。添加甘氨酸可能导致培养基颜色发生变化;

3.去掉培养皿的所有液体,用预冷的1X PBS清洗细胞2-3次;

4.收集细胞,2000g离心5min,去上清;

5.细胞沉淀,干冰运输。



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