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发布日期：2022-02-25 来源：GM
1.服务介绍
慢病毒是逆转录病毒的一种。构建的慢病毒siRNA/miRNA载体，与化学合成的siRNA和基于瞬时表达载体构建的普通siRNA载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系。并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达。
2. 实验结果展示
293T包装前(200X) :
293T包装后白光视野72h(200X):
293T包装后荧光视野72h(200X):
HCT116稳定细胞株 白光视野（200x）:
HCT116稳定细胞株 荧光视野（200x）:
3.实验流程
接种293T细胞——培养12h，密度90%，病毒包装——6h换液——72h后，病毒收集，-80℃冻存——目的细胞铺板，病毒感染——24h-72h后根据观察荧光加嘌呤筛选——得到稳转细胞株，扩大培养，待后续实验。
4.注意事项
（1）适度消化：消化过程中应该注意培养细胞的形态变化，一旦胞质回缩，连接变松散，或有成片浮起的迹象就要立即终止消化；
（2）细胞铺板密度至关重要，一般来说，当细胞密度达到90%～100%时进行转染可以取得较高的包装效率，过低会影响转染效果；
（3）病毒转染后，可以通过显微镜下观察荧光或者空斑的形成来初步判断病毒是否包装成功。
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