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简介:

1.服务介绍:

TUNEL 技术, 即脱氧核苷酸末端转移酶( Term inal2deoxynucleo t idyl t ran sferase, TdT )介导的x2dU TP 缺口末端标记(TdT 2m ediatedx2dU TP n ick end labeling, TUN EL ) 技术, 是目前原位检测细胞凋亡*敏感、快速、特异的新方法, 已广泛用于生物、医学研究领域。TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL)是一种用来检测细胞凋亡(apoptosis)的分析方法.细胞凋亡有一项重要的特征为细胞内的DNA会碎裂成片段(DNA fragmentation),TUNEL可以有效的去探测DNA片段的产生,所以可以传达细胞凋亡的讯息.TdT为terminal deoxynucleotidyl transferase,此种酵素可以在没有DNA模板的情形下,连结核甘酸到DNA的3'-OH处.1992年,以色列科学家Gavrieli等人将TdT引为为标定DNA片段的一个酵素,自此衍生出TUNEL此项技术.TUNEL的好处是可以在细胞凋亡发生的早期,即可侦测到DNA片段的产生,并且可以直接使用在组织切片上,观察细胞凋亡发生的位置.所以TUNEL目前为广泛接受与使用的一种细胞凋亡的分析方法。

 

2.实验结果展示:

原位末端凋亡检测(TUNEL).jpg 

肿瘤组织TUNEL染色(显色法)

原位末端凋亡检测(TUNEL)2.jpg 

肿瘤组织TUNEL染色(荧光法)

 

3.实验流程:

显色法:切片脱蜡--通透液通透--蛋白酶K--过氧化物酶封闭--孵生物标记素--终止液终止--加Steptavidin-HRP工作液--DAB显色--酒精脱水--二甲苯透明--中性树胶封片

荧光法:切片脱蜡--通透液通透--蛋白酶K--过氧化物酶封闭--孵生物标记素--洗涤后含DAPI封片


4.送样运输要求:

取材保持组织新鲜(组织块以小于2cm*1.5cm*0.3cm为宜),立即放入固定液(固定液用10%福尔马林液或4%多聚甲醛缓冲液,体积为组织块的10倍以上)中,避免干燥,4°冰箱保存。


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