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Thermo T7 RNA Polymerase <<TT7>>    TRL-201
Thermo T7 RNA Polymerase <<TT7>> TRL-201
产品简介:Thermo T7 RNA Polymerase <<TT7>>
产品价格:¥500
商品货号:TRL-201

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简介:
物料货号中英文名包装规格市场价
TRL-201Thermo T7 RNA Polymerase <<TT7>>7500U × 1500
TRL-201BThermo T7 RNA Polymerase <<TT7>>(7500U × 1) ×52300

用途


●高标记RNA探针的制备
●RNA splicing反应前体的制备
●以Cap类似物为引物,制备具有Cap构造的mRNA
in vitro 翻译用mRNA的制备


说明


 Thermo T7 RNA Polymerase是用基因工程学方法对T7 phage来源的RNA Polymerase导入了点突变,提高了耐热性。
相对于野生型T7 RNA Polymerase,提高了耐热性,在高达50℃下仍可进行反应、且在37℃下的比活性也有了提高。


 


实验例


1.热稳定性的比较


将野生型T7 RNA Polymerase在48℃,Thermo T7 RNA Polymerase在50℃条件下进行温育,比较其残余活性。
结果显示,野生型T7 RNA Polymerase在48℃温育5min.后,活性降低为原来的约1/10,而Thermo T7 RNA Polymerase在50℃温育15min.后活性仍未见下降。

50℃时的半衰期
野生型T7 RNA Polymerase <1.9min.
Thermo T7 RNA Polymerase 84.5min





2.高温下in vitro 转录反应


使用野生型 T7 RNA Polymerase与Thermo T7 RNA Polymerase ,比较了各温度下in vitro 转录的活性。
以0.5μg含有T7启动子的质粒为模板,加入RNase Inhibitor 20U和两种酶各25U,在37~51℃的各温度下反应60min.,然后对反应产物进行电泳。


结果显示,Thermo T7 RNA Polymerase 在51℃条件下,仍可进行转录反应。





参考文献


1)K. Ishikawa et al., Nucl. Acids Res., 33: e112(2005)
2)M. Itoh et al., Nucl. Acids Res.,30: 5452-5464(2002)
3)M. Chamberlin and J. Ring, J.Biol. Chem., 248: 2235(1973)
4)M. Chamberlin and J. Ring, J.Biol. Chem., 248: 2245(1973)


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