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TArget Clone TAK-101
TArget Clone TAK-101
产品简介：TArget Clone
产品价格：￥300
商品货号：TAK-101

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简介：
物料货号中英文名包装规格市场价
TAK-101TArget Clone10次份 × 1支300
TAK-101BTArget Clone10次份 × 5支1380

用途


●普通的TA克隆 「TArget CloneTM」
●KOD系列扩增得到的平滑末端产物的TA克隆 「TArget CloneTM -Plus-」
●对KOD系列扩增得到的平滑末端产物进行加dA反应 「10×A-attachment Mix 」


说明


本品是高效率TA克隆试剂盒。Taq系列酶扩增的PCR产物及KOD系列酶扩增的平滑末端PCR产物均可直接进行TA克隆。Taq、Tth DNA polymerase、Blend Taq®、KOD Dash等酶的扩增产物的3'末端通常带有dA,可直接与T载体连接(→使用TArget CloneTM)。
另外，KOD系列(KOD -Plus-系列以及KOD FX系列)的PCR产物的3'末端基本已被平滑化，PCR产物不能直接进行TA克隆。为了使扩增产物能够进行TA克隆，可使用TArget CloneTM -Plus-，用10×A-attachment Mix在平滑末端添加碱基(主要是dA)。
10×A-attachment Mix中含有对末端添加碱基的Taq DNA polymerase和用来中和反应后残留的KOD的3'→5'Exonuclease活性(校正活性)的抗KOD抗体。



 


特征


●快速・高效率
连接反应*快可在5分钟内完成。

●可靠
载体中有LacZ，可进行蓝白斑筛选。

●方便
在多克隆位点的两端带有转录用的启动子(T7、T3)，可用于转录产物的配制。

●可用于平滑末端PCR产物《TArget Clone -Plus-》
在TA克隆试剂盒中添附了『A-attachment Mix』，使用更方便，是KOD系列专用的TA克隆试剂盒。平滑末端PCR产物无需纯化，将其与『A-attachment Mix』混合，只需10分钟即可完成加dA反应。 




 


实验例


使用各类PCR产物比较TA克隆的效率用高保真性酶KOD -Plus-、KOD -Plus- ver.2及Blend Taq，对来自human genome的β-globin基因0.5kb进行PCR扩增。分别用TArget Clone以及TArget CloneTM -Plus-对未经纯化的PCR产物进行TA克隆，连接到pTA2 载体。结果可见，对KOD -Plus-、KOD -Plus- ver.2的扩增产物进行克隆时，使用TArget CloneTM -Plus-，克隆效率可得到大幅度提高。

另一方面对Blend Taq的扩增产物进行克隆时，用TArget CloneTM -Plus-相比，虽然效率有很大下降，但是使用TArget Clone也可以高效率地进行TA克隆。 





 

参考文献


1) H. Mizuguchi et al., J. Biochem. (Tokyo), 126: 762-768　(1999)


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