科研试剂

用途

●酶反应后从DNA溶液中纯化DNA
●从琼脂糖凝胶(TBE及TAE胶)中纯化DNA

说明

本试剂盒是用于从酶反应后的DNA溶液和电泳后的琼脂糖凝胶中纯化出高纯度DNA片段的试剂盒。
利用磁硅珠能吸附溶液中的DNA的原理，简便低成本地回收DNA。纯化的DNA中不含蛋白质和盐等杂质，可以直接用于PCR产物的测序、限制酶、连接反应等多种用途。
本试剂盒可用于PCR反应后引物(引物二聚体)・dNTPs的去除、碱性磷酸酶处理后的脱蛋白处理、电穿孔前DNA样品的脱盐处理、酶反应后缓冲液置换等多种从样品中抽提纯化DNA片段的用途。电泳后从琼脂糖中纯化DNA时，本产品使用了威力强大的离液盐来代替以往的NaI法，所以室温下能在短时间内融解琼脂糖凝胶。另外，与市售的使用硅胶粒和基质的离心柱不同，本试剂盒可根据样品量来自由调整处理规模，因而既经济又方便。
本试剂盒，可与磁珠分离专用台架一起使用。

特征

●从各种样品中进行抽提，都能获得良好的回收率

能从酶反应溶液和电泳的琼脂糖凝胶中以平均70%以上得率回收高纯度的DNA。

●可简便地在短时间内完成抽提

利用磁硅珠对DNA的吸附性原理，能简便地在短时间内 (DNA溶液约5分钟，琼脂糖凝胶约15分钟)抽提出60bp～50kb的DNA。从琼脂糖凝胶中纯化的时候，不需要以往琼脂糖凝胶融解所需的加热或水浴等步骤。

●安全

无需苯酚/氯仿等有害溶液处理。

●低成本

每处理1个样品只需要花费很少的成本，性价比非常高。

实验例

1.从溶液中回收DNA

取以λDNA为模板的PCR(120bp、1kb、2kb)反应液及φX174/HinfⅠ Marker(0.25μg/μl)各100μl，按照试剂盒的操作步骤进行纯化，将产物溶于100μl的灭菌水中。回收后，分别对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳及对Marker进行聚丙烯酰胺电泳进行分析。

结果显示，用本试剂盒可以高纯度地回收DNA片段，并可除去PCR产物(1kb)中出现的引物二聚体。另外，本公司的试剂盒能与其他公司的产品一样，可回收40〜60bp以上长度的DNA片段。

2.从琼脂糖凝胶中回收DNA

取PCR产物(120bp、1kb、2kb)及λ DNA溶液(48.5kb)各40μl，分别在TBE琼脂糖凝胶和TAE琼脂糖凝胶中进行电泳，切下含有目的片段的凝胶，用本试剂盒进行纯化，产物溶于40μl灭菌水中，然后通过电泳进行检测。结果显示，各PCR产物的回收率约为70〜80%，λ DNA的回收率约为60%左右。另外，使用其他公司试剂盒的结果中，可知某些DNA的回收量极低。
在电泳图中可以看到，回收前后λDNA的移动程度有变化，这是因为在回收前后DNA溶液的盐浓度不同所导致的结果。
另外，其他实验已经证明，回收得到的DNA可以用在测序、限制酶处理、连接反应等各种场合。