科研试剂

用途

PCR

说明

本产品是以KOD DNA polymerase为基础开发的高保真性 PCR用酶。在本公司的PCR酶中保真性*高。本酶通过 对Buffer组分的改良及采用热启动方法，与原来的产品 KOD DNA polymerase相比，保真性、PCR效率有了 非常显著的提升。KOD -Plus- Ver.2由于对KOD -Plus- 的Buffer进行了进一步的改良，PCR成功率更高。

特征

●优良的保真性（本公司同类产品中为**）

KOD DNA polymerase的特点是具有非常高的保真性，而KOD –Plus-的保真性有了更大的提高。大约为Taq DNA polymerase的80倍。*适用于克隆。

●通过热启动提高了PCR反应效率
通过将2种抗KOD单克隆抗体预混在酶中，抑制了常温状态下的多聚酶活性（该活性是产生非特异性反应的主要原因）和3'→5'核酸外切酶活性。抗体在PCR的预变性步骤即发生失活，对扩增反应没有任何影响。

●延伸性・扩增效率的提高
对反应Buffer的组分进行了优化，使之较以往的KOD DNA Polymerase延伸性・扩增效率均有很大的提高。

●超群的耐热性
因其耐热性比Taq DNA Polymerase更为优良，故可以将热变性步骤的温度设定值提高，对GC含量高，容易形成高级结构的目的片段尤其适用。

●高PCR成功率【KOD -Plus- Ver.2】
对难扩增的目的片段、长目的片段的PCR成功率比KOD -plus-更高。另外，也降低了带入的逆转录反应液对PCR反应的抑制。

实验例

1. 各公司PCR酶的保真性

关于PCR保真性，与其他公司PCR酶相比，可得知KOD -plus-的保真性*高。

该保真性为Taq DNA Polymerase的约82倍。

2. 与其他公司高保真性PCR酶在PCR扩增性能方面的比较

以Human β-globin基因3.6kb为目的片段，用KOD -Plus-及其他公司的高保真性PCR酶进行扩增并比较。
结果可见，与其他公司的High Fidelity酶相比较，KOD -Plus-显示了良好的扩增效果。

3.用各种cDNA为目的片段与其他公司PCR用酶在PCR扩增性能方面的比较

以HeLa total RNA逆转录的cDNA为模板，对4种目的片段进行PCR并比较其效率。
结果可见，与其他酶相比，KOD -Plus- Ver.2显示了良好的扩增效果。特别是对难扩增的6.8kb的目的片段，也能得到明亮的扩增条带。

参考文献

1) J. Mo et al., J. Mol. Biol., 222: 925-936(1991)
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