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KOD FX     KFX-101
KOD FX KFX-101
产品简介:KOD FX
产品价格:¥1200
商品货号:KFX-101

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简介:
物料货号中英文名包装规格市场价
KFX-101KOD FX200U×11200
KFX-101BKOD FX(200U×1) ×55550
KFX-101CKOD FX(200U×1) ×1010160


用途


PCR


说明



KOD FX是在KOD DNA polymerase基础上开发的高性能PCR试剂。
本酶具有出色的「扩增成功率」、「延伸性」和「扩增效率」,可对各种长度的目的片段进行PCR。
KOD FX是PCR成功率非常高,适合于各种实验条件的PCR酶。
实际测序结果表明,KOD FX在PCR过程中,产生碱基错配的频率(错配率)144535个碱基中仅为19个(保真性是Taq DNA polymerase的约11倍)。由此可见,KOD FX的保真性虽比KOD -Plus-、KOD -Plus-Ver.2和KOD -Plus- Neo要差一些,但仍可进行充分的克隆。通过本酶扩增的DNA片段的末端基本上都被平滑化。




 


特征


高扩增成功率
对高GC含量的目的片段、细胞悬浊液、小鼠尾巴/植物裂解液、全血、霉菌、酵母等粗样品也可进行高成功率扩增。


超群的扩增效率
由于得率很高,因此即便模板量很少也可进行扩增。


出色的延伸性
已确认:以λDNA为模板可以扩增出40kb;以人类基因组DNA为模板可扩增出24kb;以cDNA为模板可扩增出13.5kb。


通过热启动提高了PCR的反应效率
通过将2种抗KOD单克隆抗体预混合在酶中,抑制了PCR反应前常温状态下的多聚酶活性和3'→5' Exonuclease活性。抗体在PCR*初的变性步骤即发生失活,但对扩增反应没有任何影响。 


注: Buffer A的配置方法请点击下载附件。

 


实验例


1. 碱裂解法制备的鼠尾裂解液的扩增例

向直接PCR反应液中添加碱裂解法(请参照右边的基本反应条件)制备的鼠尾裂解液0.5μl,以Mouse membrane glycoprotein(Thy-1)gene(M10246)为目的基因,用2步法循环,作30个循环的扩增。

结果显示,只有使用KOD FX时,才可以确认到明确的扩增。碱裂解法,相比使用Proteinase K的方法,操作简单,可以更加简便地分析转基因鼠的基因。

另外,扩增产物无须纯化,以下是用几种限制性内切酶消化处理的结果,可以确认扩增产物可被内切酶完全消化切断。




2. 一步法制备的植物裂解液的扩增例

向直接PCR反应液中添加一步法(请参照右边的基本反应条件)制备的番茄、烟叶、稻叶及精米裂解液1μl,以rbcL为目的基因,用2步法循环,作30个循环的扩增。

结果显示,只有使用KOD FX时,才可以确认到明确的扩增。通过将一步法与KOD FX组合,就可以简便地对植物基因进行分析。



3. 模板DNA量的探讨

使用KOD FX与其他公司的PCR酶,比较了模板DNA的量与扩增效率。

扩增反应中,以0.1ng~100ng的基因组DNA为模板,以human β-globin 2.8kb为目的基因,50μl反应体系,引物15pmoles,KOD FX使用了1U,按2步法,作了30个循环的扩增。

结果显示,相比其他公司的PCR酶,KOD FX可以得到更高的扩增效率。


※其他的实验例


实验例11: 血液(Whole Blood)样品扩增例

实验例12: 培养细胞的扩增例 直接使用细胞悬浊液样品

实验例13: 植物样品(叶・米粒)的PCR扩增例

实验例16: 使用人头发样品进行简便PCR扩增例

实验例21~22

实验例23~24

实验例34: 对福尔马林固定石蜡包埋切片提取的DNA的分析

实验例5: Long Target(〜40Kb)的扩增例

实验例6: 挑战扩增真核细胞*长基因DMD(13.5Kb)的PCR克隆

实验例7: 少量模板(0.1ng~100ng)的扩增例

实验例10: 鼠尾裂解液的扩增例

实验例14: 直接使用鼠尾裂解液:转基因鼠的基因分型

实验例15: 使用转基因鼠鼠尾扩增进行基因分型例

实验例17~20

实验例25: 通过菌落PCR确认酵母重组体

实验例26: 新的水稻OsSRS3基因5′端区域的分离

实验例27: 使用从人粪便提纯的DNA扩增Helicobacter pylori cagA基因

实验例28: 从转基因大鼠血液(滤纸血)检测GFP基因

实验例29: 用DGGE法对沿海生息的植物-浮游生物(隐藻cryptophyta)的多样性分析

实验例30: 使用KOD FX的绿脓菌DNA的基因扩增

实验例31: 小鼠尾巴裂解液的基因组DNA的扩增

实验例32: 对病原酵母Cryptococcus neoformans菌体(菌落)的直接PCR

实验例33: 对米曲菌(Aspergillus oryzae)直接PCR

实验例35: 使用KOD FX对黄色黑腹果蝇羽翼的简便Long PCR法

实验例36: 使用KOD FX对小鼠滤纸血的PCR分析

实验例37: 用KOD FX扩增淡水刚毛藻属藻类(绿藻)DNA片段

实验例38: 用KOD FX对曲霉菌Aspergillus oryzae基因破坏的确认

实验例39: 用KOD FX通过菌落直接PCR检测各种细菌DNA

实验例40: 高成功率PCR酶 用KOD FX对指甲直接进行PCR

实验例41:使用高成功率PCR酶KOD FX

实验例42:用KOD FX对植物叶进行迅速的DNA扩增

实验例43: 通过鳉鱼幼鱼的基因判断其性别的方法

实验例8: 引物设计有限制时的扩增例

实验例9: GC含量高的目的片段的扩增


 

参考文献


1) K. Wakahara et al., Mol Cancer Res 6: 1937-1945.(2008)
2) N. Yamada et al., Mol Vis., 15::974-979.(2009)


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