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Pull-down
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简介:

1.服务介绍:

Pull-down(拉下实验)是将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过SDS-PAGE电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白,“诱饵蛋白”和“捕获蛋白”均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。

 

2.实验结果展示:

SDS-PAGE分析不同金属化CAs pull-down

Pull-down.jpg 


3.实验流程:

体外表达纯化诱饵蛋白——固相化诱饵蛋白——混合孵育——除去未结合蛋白——洗脱——SDS-PAGE分析/质谱分析

 


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